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馬血清的凍融,細節很重要
馬血清一種破傷風抗毒素,它對人體是一種異性蛋白,具有抗原性過敏反應,因此在用藥前先作過敏試驗。試驗結果為陰性可直接注射破傷風抗毒素,試驗結果為陽性者,則應進行脫敏注射。在用過破傷風抗毒素超過一周者,如再使用,還須重作皮膚試驗。還有傷口愈合期間,要注意不要碰到水,經常對傷口進行消毒。
馬血清凍融說明:
1.將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小時左右使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規則地搖晃均勻。
2.切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的血清直接放在水浴中,無論室溫的水或者37℃的水,因為在水浴中血清迅速熔化,很大的溫差(-20℃到37℃,溫差為57℃)極其容易造成血清產生沉淀。
3.直接放65℃水浴中更是極其不對的做法,是對血清的褻玩,對科學規則的粗暴踐踏!
4.血清應該在-10 ℃以下保存。若一次無法用完一瓶,應該無菌分裝,再冷凍保存。
5.若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起培養。
6.不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
7.馬血清在貯存解凍過程中會產生沉淀,這是由于血清中含有大量脂蛋白、纖維蛋白及多肽類物質,在-15℃冷凍保存解凍后就會自然形成沉淀,隨著保存時間的延長,沉淀量會增加。因此在融化血清時一般應先在4℃放置使之解凍,然后放在室溫使血清*融化,以避免沉淀的增加。添加血清時應避免把沉淀加入培養液,否則由于沉淀的存在會使得所培養的細胞產生大量黑點,或者細胞表面將會覆蓋一層油狀物質,影響細胞的正常生長。為減少血清的損失,可以把有沉淀的血清收集起來進行離心處理,將上清液加入培養液使用(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。
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